
TBE中的三個(gè)字母分別代表:Tris、Boric acid(硼酸)和EDTA,TBE也是常用的DNA瓊脂糖凝膠電泳緩沖液,常配成5倍貯存液于室溫保存。
TBE主要有2個(gè)優(yōu)點(diǎn):一是緩沖容量大于TAE,適合于長時(shí)間電泳;二是對(duì)于1kb以下的DNA片段分離效果好于TAE。TBE的最大缺點(diǎn)是不大適合于DNA瓊脂糖膠回收實(shí)驗(yàn),原因是TBE用于瓊脂糖凝膠時(shí)易造成高電滲作用,并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價(jià)結(jié)合的四羥基硼酸鹽復(fù)合物而使DNA片段的回收率降低的緣故;另外,還需注意超螺旋DNA在TBE中電泳時(shí)測(cè)出的相對(duì)分子質(zhì)量會(huì)大于實(shí)際分子質(zhì)量。
基于上述知識(shí),TBE推薦用于質(zhì)粒鑒定和膠回收以外的常規(guī)DNA電泳,特別是小于1kb的DAN分子的電泳。
1. 超純水配制,避免引入核酸酶。
2. 統(tǒng)一原料,統(tǒng)一流程,確保品質(zhì)穩(wěn)定可靠。
3. 即用型,只需要稀釋即可,無須其它操作。
配方:
108g Tris (890 mmol/L)
55g 硼酸 (890 mmol/L)
40ml 0.5mol/L EDTA, pH8.0 (20 mmol/L)